本发明公开了一种安全长效的多功能伤口敷料的制备方法，属于生物医用材料技术领域，包括如下步骤：S1.合成甲基丙烯酸季铵化合物（QAC）；S2.制备苯乙烯磺酸钠（SSNa）/丙烯酸（AA）/QAC复合溶液；S3.制备SSNA/AA/QAC多功能生物膜。本发明通过原位交联聚合共聚合法制备多功能生物膜，在生物膜表面引入磺酸基、羧基等生物活性基团及QAC，利用生物活性基团提高敷料表面的血液相容性和细胞相容性，利用QAC赋予敷料优异的抗菌性能。该伤口敷料的制备方法简单易行且成本较低，同时，由于三种单体形成互穿交联结构，使其生物功能性及抗菌性能安全持久，不易引发细菌耐药性，适用于生物医疗领域。