本发明提供了一种针对糖尿病创面的细菌纤维素水凝胶敷料及其制备方法，所述水凝胶敷料包括羧基化细菌纤维素和氨基化葡萄糖氧化酶，所述羧基化细菌纤维素与所述氨基化葡萄糖氧化酶通过酰胺键连接。所述水凝胶敷料还包括普乐沙福；所述普乐沙福负载在所述水凝胶敷料的内部。本发明水凝胶敷料的表面通过酰胺键接枝葡萄糖氧化酶，能够起到降低创面中葡萄糖的作用，而葡萄糖氧化酶不会进入血液循环；与此同时，改性纤维素敷料中还通过物理吸附作用负载了干细胞动员药AMD3100，该药物能够在敷料与创面接触时释放到体液中，其作用在于促进创面处新生血管的生成。